在提取无乳链球菌总蛋白的时候，按照别人的实验方法提，发现并没有蛋白。
实验方案
1 ）取10 mL菌液离心弃上清，无菌PBS清洗两次
2 ）沉淀中加入300 μL 20mg/ml溶菌酶溶液，吹打使菌体混匀，37 ℃条件下水浴2 h。
3 ）水浴之后，向EP管中加入5 mL无菌水，超声波破碎菌体细胞时间30 min，程序设定：200 W,超声波破碎时间8 s，间隔6 s
4 ）超声波破碎完成后再加入500 μL 4 ℃预冷的饱和三氯乙酸，冰浴45 min。
5 ） 将冰浴后50 mLEP管于4 ℃、12000 r/min的条件下离心30 min，保留离心后沉淀，弃去上清。（实操时发现管壁有大量渣子，并且冲不掉）
6 ）离心完成后，加入已于− 20 ℃预冷的丙酮9 mL重悬，，4 ℃、12000 r/min的条件下再次离心10 min（重悬的时候我把能冲下来的杂质也冲下来了，然后离心的时候就分不清哪里是蛋白，哪里是杂质）
7 ）保留离心后沉淀，弃去上清，最后加入100 μL蛋白溶解液溶解沉淀，将其转移至2.0 mL EP管中，保存在− 80 ℃冰箱中。
实验方案
1 ）取10 mL菌液离心弃上清，无菌PBS清洗两次
2 ）沉淀中加入300 μL 20mg/ml溶菌酶溶液，吹打使菌体混匀，37 ℃条件下水浴2 h。
3 ）水浴之后，向EP管中加入5 mL无菌水，超声波破碎菌体细胞时间30 min，程序设定：200 W,超声波破碎时间8 s，间隔6 s
4 ）超声波破碎完成后再加入500 μL 4 ℃预冷的饱和三氯乙酸，冰浴45 min。
5 ） 将冰浴后50 mLEP管于4 ℃、12000 r/min的条件下离心30 min，保留离心后沉淀，弃去上清。（实操时发现管壁有大量渣子，并且冲不掉）
6 ）离心完成后，加入已于− 20 ℃预冷的丙酮9 mL重悬，，4 ℃、12000 r/min的条件下再次离心10 min（重悬的时候我把能冲下来的杂质也冲下来了，然后离心的时候就分不清哪里是蛋白，哪里是杂质）
7 ）保留离心后沉淀，弃去上清，最后加入100 μL蛋白溶解液溶解沉淀，将其转移至2.0 mL EP管中，保存在− 80 ℃冰箱中。
