以1%戊巴比妥钠溶液（50mg/kg）腹腔注射麻醉大鼠。
将大鼠固定于手术台上，沿中线切开头皮挂线旷置。
手术显微镜下沿眶内缘小心分离左眶软组织，尽量向两眦延伸和视神经眶内段。
依照解剖层次分别牵开眼外肌肉，充分暴露眼球后极纵向切开视神经背侧鞘膜，注意避免伤及视网膜中央动脉。
在眼球后极1.5mm处以显微剪剪断视神经。